OD600細(xì)胞濃度儀檢測(cè)原理

OD600 DiluPhotometer™分光光度計(jì)是一款小巧，易于操控的儀器，專門(mén)用于測(cè)量接近600 nm波長(zhǎng)處的樣品。它適用于包括大腸桿菌和酵母等多種細(xì)胞的生長(zhǎng)速度的測(cè)量。OD600 DiluPhotometer™分光光度計(jì)搭配使用Implen’s DiluCell™ 10或DiluCell™ 20自動(dòng)稀釋比色皿方便測(cè)量樣品量少的樣品（各自僅需200 µl 和100 µl的樣品量）。 DiluCell™ 10和DiluCell™ 20兩個(gè)型號(hào)的比色皿可分別對(duì)樣品進(jìn)行10倍和20倍稀釋。在帶寬為40 nm的OD600上也可用Bradford法（595 nm）定量分析蛋白質(zhì)。OD600 DiluPhotometer™分光光度計(jì)的小巧性和便攜性使其便于在培養(yǎng)箱和厭氧條件下使用。

OD600 DiluPhotometer™經(jīng)設(shè)計(jì)用于在波長(zhǎng)600 nm附近進(jìn)行分光光度分析，測(cè)定細(xì)菌和酵母生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)定量（例如Bradford法）。該儀器采用電池供電操作，可以方便地搬到培養(yǎng)室中，也可在厭氧條件下使用。充滿電后電池可使用1個(gè)月。通過(guò)600nm LED光源與光纖結(jié)合，可進(jìn)行光密度測(cè)量。如有液體灑出，可以很容易地從表面擦掉，可以用甲醛、環(huán)氧乙烷對(duì)樣品槽區(qū)清洗消毒.

朗伯比爾定律

朗伯-比爾定律，也稱為比爾定律，將光吸收與樣品的屬性關(guān)聯(lián)在一起。這一定律表明，光通過(guò)特定樣品時(shí)（T =I/ IO，I=透射光，IO =入射光），特定化合物的摩爾消光系數(shù)（ε）、材料中吸附物種的濃度（c）和光傳播距離（d）之間存在對(duì)數(shù)關(guān)系 。當(dāng)保持所有條件不變而只改變光程（光傳播距離）時(shí)，可以通過(guò)比爾定律自動(dòng)變化樣品稀釋度。OD600 DiluPhotometer™和DiluCell™結(jié)合使用，使得這一原則得以實(shí)現(xiàn)。 

自動(dòng)樣品稀釋
以前必須使用體積至少為1ml的標(biāo)準(zhǔn)比色皿，而且需要額外手動(dòng)操作稀釋樣品。采用Implen的DiluCell™時(shí)，所需樣品量較低，且可以自動(dòng)稀釋樣品。DiluCell™比色皿的*設(shè)計(jì)使光程從標(biāo)準(zhǔn)的10 mm降到0.5 mm（DC 20）或1.0 mm（DC 10）。根據(jù)朗伯-比爾定律，光程縮短可以將樣品自動(dòng)稀釋20倍（DC 20）或10倍（DC 10）。DiluCell™自動(dòng)稀釋可以節(jié)省時(shí)間，并排除了稀釋誤差和交叉污染。

Bradford法蛋白質(zhì)定量
Bradford法是一種快速而的總蛋白質(zhì)濃度測(cè)定方法，通過(guò)將未知蛋白與考馬斯亮藍(lán)G-250染料結(jié)合來(lái)定量測(cè)定樣品的蛋白質(zhì)濃度。這種方法的定量依據(jù)是，在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合后，考馬斯亮藍(lán)G250的大吸收從465nm遷移到595nm。將上述結(jié)合與其他不同的、已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白與染料結(jié)合進(jìn)行比較，從而計(jì)算未知蛋白的濃度。以牛血清白蛋白（BSA）標(biāo)準(zhǔn)曲線為例。