固相萃取法用于土壤中磺酰脲類除草劑殘留量的測定

1 前言 磺酰脲類除草劑是一種能有效防除闊葉雜草的除草劑，它具有低毒和高選擇性的優點。 但殘留藥害十分突出，容易影響地表水的水質，所以，其在生態方面尤其是土壤中的安全性 受到人們的高度重視。土壤中微量的磺酰脲類除草劑殘留就可對當茬及后茬作物造成藥害， 且對環境帶來的污染和生態毒性也十分嚴重。因此，對磺酰脲類除草劑在土壤中環境行為進 行研究具有重要意義。本文用 SPE400 全自動機械臂固相萃取儀對土壤中磺酰脲類除草劑殘 留量的整個檢測過程中的凈化環節進行了實驗，有效的縮短了樣品中目標物的固相凈化所需 要的時間，提高了工作效率，也節約了人力。

2 儀器與試劑

2.1 儀器 SPE400 全自動機械臂固相萃取儀；液相色譜-質譜儀；超聲波清洗機；離心機；渦旋混 合器 2.2 試劑及耗材 乙腈（色譜純）、磷酸二氫鉀、磷酸（83%）、氫氧化鈉、冰乙酸 農藥標準物質：純度≥96% C18柱，6ml，填充物 500mg 磷酸緩沖溶液：0.038mol/L 的磷酸二氫鉀溶液用氫氧化鈉調節 pH 至 7.8； 磷酸緩沖活化液：磷酸緩沖溶液用磷酸調節 pH 至 2.5；’ SPE-02-2019 07 2 乙腈+磷酸緩沖溶液（2+8）：20mL 乙腈和 80mL 磷酸緩沖溶液充分混勻后備用； 乙腈+磷酸緩沖溶液（9+1）：90mL 乙腈和 10mL 磷酸緩沖溶液充分混勻后備用。

3 實驗方法

3.1 實驗步驟 3.1.1 取樣 土壤樣品經過研磨過 1mm 篩后備用。

3.1.2 提取 稱取過篩后的土壤樣品 10g 于聚四氟乙烯離心管中，加入 10mL 的乙腈+磷酸緩沖溶 液（2+8），在渦旋混合器中劇烈渦旋 1min 后超聲提取 5min，再在 4000r/min 下離心 5min， 提取步驟重復 3 次，每次提取液均為 10mL。合并 3 次提取并離心后的上清液于 20mL 樣品管 中，加入約 1mL 磷酸（83%）調節溶液 pH 至 2.5±0.1，待凈化。 （稱樣后） （加入提取液后） SPE-02-2019 07 3 （離心后）

3.1.3 固相小柱凈化 過程 試劑名稱 用量 速度 等待時間 氮吹時間 空氣助推 次數 活化 乙腈 5mL 5mL/min 0s 0s 2mL 1 磷酸緩沖溶液 5mL 5mL/min 0s 0s 2mL 1 上樣 13mL 2mL/min 0s 600s 2mL 1 潤洗上樣 乙腈+磷酸緩沖溶液 （9+1） 13mL 60mL/min 0s 0s 2mL 2 洗脫 乙腈+磷酸緩沖溶液 （9+1） 3mL 3mL/min 5s 0s 2mL 1 收集的洗脫液于氮吹儀上吹干后，用 1mL 乙腈定容供色譜測定。

3.1.4 色譜測定條件 色譜柱：C18 柱溫箱溫度：30℃ 進樣體積：10uL 檢測波長：254nm SPE-02-2019 07 4 流動相組成 時間（min） 水（0.2%冰乙酸）的體積分數（%） 乙腈的體積分數（%） 甲醇的體積分數（%） 0.00 80 10 10 14.00 10 45 45 16.00 4 48 48 18.00 80 10 10

3.1.5 質譜條件 采用正電子電離方式，掃描范圍 m/z100~500，碎裂電壓為 2.75V，噴霧電壓為 3.5kV， 霧化氣壓力為 40psi，干燥氣（N2）流速為 6mL/min，溫度為 350℃，碰撞氣為氦氣。9 種磺 酰脲類除草劑的質譜檢測結果參照其國標標注。

3.1.6 色譜測定 定性測定：保留時間及質譜提取離子定性，如果此方法不能確證，可以采用以下方式， 將前處理后的樣品按照一定倍數濃縮后或者按照進樣量重新進樣。 定量測定：分別吸取 10uL 混合標準溶液及樣品凈化液注入色譜儀中，以試樣的提取離子 峰面積與標準峰對應提取離子峰面積比較，外標法定量。

4 結果與討論

4.1 活化步驟的流速保持適中，活化液充分濕潤吸附劑即可。上樣和洗脫過程流速 應當適當慢一些，以使目標物盡量多的保留在柱內以及后可以將其洗脫。

4.2 上樣步驟里國標要求樣品溶液全部過柱后抽真空 10-15min，因儀器采用的全部是正 壓上樣，故可以設置為氮吹 10min 代替抽真空。

4.3 潤洗上樣中 60mL/min 的潤洗速度可實現噴淋潤洗，減少樣品溶液的殘留比。 SPE-02-2019 07 5

4.4 洗脫步驟里因洗脫液流出小柱較為緩慢需設置一段等待時間，以足量的洗脫液 可以充分將目標物洗脫。

4.5 整個實驗流程里默認的空氣助推即可將管路里的試劑全部排出，此外再設置一較小 體積的空氣助推有助于將小柱底部殘留的試劑排出。

4.6 結論 用固相萃取法凈化土壤中磺酰脲類除草劑殘留量的過程實現自動化，減少人力的消耗， 實驗過程中使用的有機溶劑采用密封處理，降低了對人體的傷害且儀器能的控制活化、 上樣、洗脫等溶劑流速，使樣品凈化的更為充分。

參考文獻 [1] NY/T 1616-2008 土壤中 9 種磺酰脲類除草劑殘留量的測定 液相色譜-質譜法

注意事項 磷酸緩沖溶液調節 pH 時建議使用較高濃度（如 0.5mol/L）的氫氧化鈉，避免加入的氫 氧化鈉量過多影響緩沖溶液的濃度。